Van de ELISA-test is een medisch laboratoriumonderzoek dat resulteert in een zogenaamde antigeen-antilichaamreactie. Verschillende antigenen die een rol spelen in de menselijke of diergeneeskunde kunnen worden getest. In Duitsland krijgen alleen geaccrediteerde laboratoriuminstituten de opdracht om de test uit te voeren.
Wat is de procedure?
ELISA is de afkorting voor Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay. Het is daarom een Engelstalige naam, maar het is ingeburgerd geraakt in het Duitse medische gebruik.
De ELISA-test is een van de zogenaamde immunologische methoden binnen medische laboratoriumtesten. De testprocedure kan worden gebruikt om eiwitmoleculen te detecteren in een grote verscheidenheid aan lichaamsvloeistoffen. Door de detectie van deze moleculen kunnen op hun beurt conclusies worden getrokken over bepaalde ziekten of ziektebeelden. Daarom maken artsen hun diagnose ook afhankelijk van het resultaat van zo'n ELISA-test. De testprocedure is daarom erg belangrijk in de dagelijkse klinische praktijk, poliklinisch of intramuraal.
De bijbehorende lichaamsvloeistoffen, bijvoorbeeld volbloed of vloeistoffen uit gewrichten, worden na afname bij de patiënt direct naar het laboratorium gestuurd. De monsters zijn meestal zeer urgent, omdat het inheemse materiaal als gevoelig wordt beschouwd en zo snel mogelijk moet worden onderzocht. Zogenaamde over elkaar liggende monsters kunnen tot vals-negatieve resultaten leiden omdat de op te sporen pathologische eiwitten inmiddels zijn verminderd of volledig afgebroken. Zogenaamde pre-analyse speelt een belangrijke rol bij ELISA; verdachte of negatieve resultaten moeten opnieuw worden herhaald als er klinische symptomen zijn.
Functie, effect en doelen
Reageerbuisjes en zogenaamde microtiterplaten zijn essentieel voor correct testen in een geaccrediteerd medisch laboratorium. Deze platen met fijne, semi-concave inkepingen zijn gemaakt van speciaal plastic en zijn elk bedekt met een zeer specifieke antilichaam.
Indien het te detecteren antigeen aanwezig is in een te onderzoeken lichaamsvloeistof, vindt een specifieke antigeen-antilichaamreactie plaats volgens het zogenaamde lock and key-principe. Het laboratoriumpersoneel kan het monstermateriaal handmatig met pipetten of volledig automatisch in de platen invoeren. In moderne medische laboratoriuminstituten worden alleen volledig geautomatiseerde systemen gebruikt om ELISA-diagnostiek uit te voeren.
Deze moeten echter worden gecontroleerd door opgeleid personeel, medisch-technische laboratoriumassistenten. De zogenaamde interne en externe kwaliteitscontrole is ook de verantwoordelijkheid van het laboratoriumpersoneel, boven de medische staf voor laboratoriumgeneeskunde, infectie-epidemiologie en microbiologie. Na de eerste poging, d.w.z. nadat het materiaal op de platen is gepipetteerd, hebben de specifieke antigenen in het monster, indien aanwezig, zich al gebonden aan de antilichamen op de plastic plaat.
Dit wordt gevolgd door een wascyclus met fysiologische zoutoplossing om storende factoren zoals ongewenste antigenen of eiwitten uit de batch te verwijderen. Deze stap is erg belangrijk om vals-positieve reacties te voorkomen. Een zogenaamd positief resultaat dat door het laboratorium verkeerd wordt geïnterpreteerd, kan onder bepaalde omstandigheden fatale gevolgen hebben voor een patiënt. In de tweede stap van het onderzoek wordt nog een antilichaam toegevoegd, dat is gekoppeld aan een enzym. Dit gelabelde antilichaam bindt ook aan het antigeen.
In een derde en laatste stap wordt een speciale kleurstof in een bepaalde hoeveelheid toegevoegd, die in meer of mindere mate wordt afgebroken door de resterende enzymresten. Alleen dat enzym kan worden afgebroken dat niet eerder samen met het antilichaam aan het antigeen is gebonden. Het vrije enzym is in staat de toegevoegde kleurstof te splitsen. De exacte hoeveelheid van de gespleten kleurstof kan worden bepaald met een andere medische laboratoriummethode, de zogenaamde fotometrie. Hierdoor kan een exacte conclusie worden getrokken of en hoeveel antigeen in een monstermateriaal aanwezig is.
De ELISA-test wordt niet alleen gebruikt voor de eerste diagnose of om vermoedelijke diagnoses bij bepaalde ziekten en ziektebeelden te onderbouwen, maar ook om de voortgang ervan op te volgen. Als de antigeenconcentratie in de test tijdens de therapie lager wordt, wordt de therapie als succesvol beschouwd.
Uw medicatie vindt u hier
➔ Geneesmiddelen om het afweersysteem en het immuunsysteem te versterkenRisico's, bijwerkingen en gevaren
De ELISA-test is bijzonder informatief door de detectie van antigene structuren in lichaamsvloeistoffen. De test maakt een zogenaamde kwalitatieve, maar ook semikwantitatieve en kwantitatieve uitspraak mogelijk over de veronderstelde aanwezigheid van bepaalde antigenen in lichaamsvloeistoffen.
Volbloed kan niet worden gebruikt voor het onderzoek, alleen bloedserum. Een directe test op de patiënt, bijvoorbeeld uit het capillaire bloed van de vingertop, is daarom, net als bij sommige andere serologische tests, tot op heden niet mogelijk. In de menselijke geneeskunde wordt de ELISA-test voornamelijk gebruikt om antigenen op te sporen bij bacteriële, virale of schimmelinfecties. Bovendien worden alle positieve resultaten van de hepatitis-serologie standaard opnieuw gecontroleerd met een ELISA-test.
Bepaalde hormonen, zoals het zwangerschapshormoon HCG, kunnen ook met de ELISA-test worden bepaald. Als zich tijdens de zwangerschap bepaalde complicaties voordoen, is nauwkeurige kennis van de concentratie van het zwangerschapshormoon in het bloed diagnostisch en therapeutisch zeer nuttig. Een ander indicatiegebied voor de test is de detectie van zogenaamde paraproteïnen in de urine, zoals die bijvoorbeeld voorkomen bij verschillende tumorziekten zoals multipel myeloom.
De ELISA-test wordt nog steeds in veel laboratoriuminstituten uitgevoerd, maar wordt door experts als verouderd beschouwd. De enzymgekoppelde immuunreactie in de ELISA-test wordt de laatste jaren steeds meer vervangen door radioactief gelabelde antilichamen die nog betere kwantitatieve resultaten opleveren. Deze tests zijn ook bekend als RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Verdere specifieke verdere ontwikkelingen van de ELISA zijn lichtchemische methoden zoals luminescentie of fluorescentie.
